Membrane-based Proteome Profiler Antibody Array Q&A
Q1: 어떤 원리의 제품인가요? A1: western blot을 대체할 수 있는 제품으로서, 다른 추가적 장비 필요 없이 membrane상에서 spot형태로 detection하는 원리입니다. blocking, incubation, washing, detection 과정으로 간단한 실험 과정을 통해서 최대 119가지의 proteins을 측정할 수 있기 때문에 경제적인 screening tools입니다. Q2: 측정 방법 및 특정 기계가 필요한가요? A2: 특정 기계 필요 없이, 일반적으로 western blot을 할 때 사용되는 x-ray 필름이나 chemiluminescence 기계가 가능합니다. 일반적인 기계로는 LAS가 있습니다. Q3: 한 kit당 몇 샘플의 테스트가 가능하며 실험 소요시간은? A3: Pluripotent stem cell 제품 외에 (8장의 membranes 포함) 4장의 membranes이 포함되어 있어 4번의 테스트가 가능합니다. 소요시간은 보통 6시간입니다. Q4: Kit외에 추가 구성품은 무엇인가요? A4: 1. Aprotinin (Sigma, Catalog # A6279) 2. Leupeptin (Sigma, Catalog # L8511) 3. Pepstatin (Sigma, Catalog # P4265) 4. X-ray film (Kodak_ BioMax™ Light-1, Catalog # 1788207) or equivalent Q5: Western blot과 비교해 sensitivity 정도는? A5: IP/western blot과 비교해서 20배 정도 높습니다. Q6: Membrane의 spot으로 결과를 확인할 수 있는 반정량 방식인가요? A6: 네, 반정량 방식입니다. 정량방식으로 하시길 원하실 경우, chemiluminescence 기계에서 프로그램을 이용하여 Pixel Density로 상대적인 농도를 확인할 수 있습니다. 또는 x-ray 필름의 결과를 scan하여 Densitometer 프로그램을 이용하여 상대적인 농도를 확인할 수 있습니다. Q7: Membrane의 positive control의 역할은 무엇인가요? A7: Positive control은 HRP와 반응하는 protein으로서 실험이 잘 됐는지의 여부를 확인할 수 있는 control로서 membrane의 모서리에 코팅되어 있기 때문에 끝부분의 위치를 알 수 있습니다. Housekeeping protein으로 사용할 수는 없습니다. Q8: Spot의 뚜렷하게 확인 가능한가요? A8: 네. 아주 뚜렷하게 확인 가능합니다. Q9: 사용하고 남은 시약 등의 보관 온도는? A9: 유효기간까지 냉장에서 보관 가능합니다. Q10: Screening 후에 사용할 수 있는 further study를 위한 제품들이 있나요? A10: 정량 목적의 각종 ELISA/assay kits가 있습니다. 예를 들면, Quantikine, Surveyor IC/Duoset IC, cell based ELISA 등이 있습니다. Q11: Human Phopho-MAPK Array kit에 포함되어있는 lysis buffer에는 별도의 protease inhibitor를 첨가해야 하나요? A11: 아닙니다. Kit에 포함되어있는 lysis buffer는 protease activity를 저해할 수 있는 물질이 포함되어 있기 때문에 별도의 protease inhibitor를 첨가하지 않고 사용하셔도 됩니다.	Additional Information Proteome Profiler Home Proteome Profiler Tech Tip Proteome Profiler Troubleshooting Guide
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