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Membrane-based Proteome Profiler Antibody Array Tech Tip
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Q1. Washing 횟수, buffer volume을 package insert에 표기된 것보다 줄여도 되나요? A1. 네. 횟수 및 volume은 정확히 해야만 non-specific을 줄일 수 있습니다. Q2. 한 membrane에 positive control의 spot size가 다르게 나올 경우 어떻게 해석해야 하나요? A2.
Positive control은 HRP와
반응하는
protein으로서 실험이 잘
됐는지의 여부를 확인할 수 있는
control로서 membrane의 세 모서리에 코팅되어 있기 때문에 끝부분의 위치를 알 수 있습니다. Spot size는 다양하게 나타날 수 있습니다. Q3. 실험 마지막 단계에서 developing 시간은 얼마 정도가 적당한가요? A3. Signal에 따라 다릅니다. 보통 5초 ~ 5분 정도가 적당합니다. Q4. Membrane 다룰 때 glove 사용은 필수인가요? A4. Glove가 없으시다면 소독한 핀셋으로 사용 가능합니다. 핀셋
사용 시 membrane이 찢어지지 않도록 주의해 주세요. Q5. Lysis buffer에 protease inhibitors 첨가는 필수인가요? A5. Protease inhibitors는 cells안의 protease의 작용을 억제합니다. 첨가하는 것을 권장합니다. Q6. 각 kit에 포함된 lysis buffer는 교차적으로 사용될 수 있나요? A6. 서로 다른 kit의 lysis buffer를 사용하는 경우에는 잘못된 결과가 나타날 수 있으므로 추천하지 않습니다. Q7. 사용 가능한 이미지 분석 소프트 웨어는
어떤 것이 있나요? A7. 본사에서 Proteomprofiler 분석용 프로그램으로 사용한 것은 GE
Healthcare의 ArrayVision 입니다. 이외에서 pixel intensity를 분석할 수 있는 소프트 웨어 사용가능 합니다.
Q8. Kit에서 제공되는 lysis buffer 대신 실험실에서 만든 lysis buffer/NP40 buffer를 이용해서 실험 하고 싶은데요. 가능한가요? A8. Kit에서 제공해 드리는 lysis buffer를 사용하실 것을 권장해 드립니다. Kit에 들어있는 구성품들은 가장 좋은 signal을 낼 수 있는 buffer들로 구성되어 있습니다. 만일 직접 만드신 lysis buffer를 이용해서 실험하실 경우, 실험 결과가 제대로 나오지 않을 수 있습니다.
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학술 마케팅팀: 한소영 techserv@woongbee.com Tel. 031-776-3300 (내선 122) / Fax. 031-776-3303 |