2014.06.25

Cell-Based ELISA

Cell lysate 과정 없이 2가지 Intracellular proteins 동시 분석!

 

Cell signaling protein 분석 시 아직도 Cell lysate를 만드시나요?

Target protein의 Normalization을 위한 protein을 따로 측정 하시나요?

Well에 있는 Cell을 바로, 아~무 전처리 없이, Target protein 분석& Normalization을  한번에!!

R&D Cell-Based ELISA는 연구자의 시간, 노력, 그리고 Cell까지 소중히 아껴드립니다.
 

 R&D Cell-Based ELISA를 선택 해야 하는 이유 !

 

  • 2가지 Intracellular protein 동시 분석
    • Phosphorylated & Total protein
    • Target & House keeping protein
  • Cell lysis 과정 없이 바로 assay 시작
    • 96 well plate에 cells seeding & treatment → Cells 고정 → Target abtibody 처리
    • Washing buffer & blocking buffer 성분에 의해 permeabilized cells로 전환
  • 별도의 Normalization 불필요
    • Well-to-well variations 고려
  • 10,000 cells/well 로 assay 진행 가능
  • Attached & suspension cells에 적합한 각각의 protocol 제공
  • 별도 장비 필요 없이 형광분석기 (fluorescence)만 있으면 결과 분석

 

 

 Cell-Based ELISA 원리 및 과정

 

Step 1

Step 2

Step 3

Step 4

 

 
 Cell-Based ELISA 분석 결과

 

Figure 1. Human epithelial carminoma cell (A431)에서 EGF R의  phosphorylation 확인

A431 cells에 recombinant human EGF (cat # 236-EG)를 농도별로 처리 한 후, EGF R의 phosphorylation 정도를 Human Phospho-EGF R Cell-Based ELISA (cat # KCB1095)로 측정. 이 때, EGF R phosphorylation의 normalization은 동시에 측정 한 total EGF R의 level로 진행. 왼쪽 상단은 kit의 antibodies로 Western blot 수행 한 결과

 

 Cell-Based ELISA 종류

 

구분

Description

Cat. No.

Phosphorylation

&

Total

  Phospho-EGF R/ErbB1 (Y1068)  KCB1095
 Phospho-Akt (S473) Pan Specific  KCB887
 Phospho-ERK1 (T202/Y204)/ERK2 (T185/Y187)  KCB1018
 Phospho-Histone H2AX (S139)  KCB2288
 Phospho-RelA/NFkB p65 (S536)  KCB7226
 Phospho-Tie-2 (Y992)  KCB2720
 Phospho-Smad3 (S423/S425)/Smad2 (S465/S467)  KCB3226
 Phospho-IkB-alpha (S32/S36)  KCB4809
 Phospho-ErbB3/Her3 (Y1262)  KCB5677
 Phospho-STAT3 (Y705)  KCB4607
 Phospho-STAT1 (Y701)  KCB2894
 Phospho-Smad1 (S463/S465)/Smad5 (S463/S465)  KCB7660
 Phospho-p70 S6 Kinase (T389)  KCB8963
 Phospho-PDGF R beta (Y1021)  KCB2316
 Phospho-CREB (S133)  KCB2510
 Phospho-ErbB4/Her4 (Y1188)  KCB4418
 Phospho-FRS2 (Y436)  KCB5126
 Phospho-Akt (T308) Pan Specific  KCB8871
 Phospho-STAT6 (Y641)  KCB3717
 Phospho-STAT5a/b (Y694/Y699)  KCB4190
 Phospho-ErbB2/Her2 (Y1196)  KCB4438
 Phospho-c-Jun (S63)  KCB7499
 Phospho-STAT2 (Y689)  KCB2890
 Rat Phospho-TrkA (Y785)  KCB5479
 Phospho-Bad (S112)  KCB7517
 Phospho-HGF R/c-MET (Y1234/Y1235)  KCB2480
 Phospho-PDGF R beta (Y751)  KCB1767
 Phospho-Progesterone R/NR3C3 (S294)  KCB5955
 Phospho-PRAS40 (T246)  KCB6890
 Phospho-Histone H3 (S10)  KCB7798
 Phospho-p38 MAP Kinase (T180/Y182)  KCB869
 Phospho-VASP (S157)  KCB8019

Target

&

House keeping

 Total HIF-1 alpha

KCB1935

 Total COX-2

KCB4198

 Total iNOS

KCB9502

 Total beta-Catenin

KCB1329

 Cleaved Caspase-8 (Asp391)

KCB705

 Total HO-1/HMOX1

KCB3776

 

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